液相色谱拖尾峰如何解决,一篇文章帮您解读?

液相色谱拖尾峰如何解决,一篇文章帮您解读?

          在日常的液相色谱分析过程中，我们常常遇到色谱峰拖尾的现象。那今天我们就来学习下，拖尾峰出现的缘由以及该如何改善拖尾现象。下图是一张典型的拖尾峰色谱图，我们来好好的分析分析它吧！

拖尾峰的影响？

1.影响峰高的计算

峰面积相同情况下，由于峰拖尾，它们的峰高会相差很多。当我们使用峰高来计算样品结果时就产生影响，尤其是计算最低检出限时会比较明显。

2. 影响峰面积的计算

当计算峰面积时，峰的起点和终点通一般通过色谱峰的斜率来确定。色谱峰拖尾，它的尾部基线越平缓终点就越难确认，导致峰面积定量不准。

3.影响对某些痕量组分的确认 

当前面的峰分离度不是很好时，样品峰就会容易被隐藏在前面峰的拖尾处从而无法计算。

  拖尾峰原因分析及解决方案 

          ①柱过载

          当样品量过多时会出现超载现象，包括质量过载和体积过载。

          可通过降低样品量或者增加柱直径，采用较高容量的固定相来解决。

          ②峰干扰

          其他杂峰的出现也会导致拖尾峰。

          可通过增加样品净化程序,减少干扰。也可通过调整流动相提高分离度来解决问题。 

         ③硅羟基作用

         大多数情况我们都会用到反相色谱。以常用的C18柱为例，C18是被键合在载体硅胶表面的，理想的状态是流动相中的样品只和固定相C18发生作用，而实际上一半以上的硅胶表面并没有被键合上C18,所以硅胶表面会裸露出大量的硅羟基（Si-OH）。而单独的自由的硅羟基会和流动相中的样品发生作用，形成拖尾。

        ④当样品中出现了碱性化合物，碱性基团更容易与色谱柱中的硅羟基发生作用形成拖尾峰。

        在最近的十几年中，色谱柱主要以高纯度的硅胶为载体，从而使得硅胶表面尽可能减少自由的硅羟基。用来减少拖尾峰的产生。那么对于过去的自由硅羟基较多的色谱柱可加三乙胺,与硅醇基作用钝化色谱柱。对硅胶载体为主的新型色谱柱，可增加缓冲液或盐的浓度来降低流动相PH值,纯化样品来抑制硅胶的离子化，从而达到改善拖尾的效果。

       ⑤柱塌陷或形成短路通道

色谱柱经过较高的压力后，柱头会发生塌陷。这种塌陷是不可逆转的，我们只能直接更换色谱柱。

       ⑥死体积或柱外体积过大

接头不合适就会产生死体积，死体积或柱外体积过大，就会导致样品在死体积处发生了滞留和扩散。这时一般建议在液相色谱中正确安装并且使用与您的仪器匹配的管线接头，以减少死体积的产生。

       ⑦柱效下降

当色谱柱经历过高温，强酸，或者一些极端使用方法导致固定相流失较多后，色谱柱中的自由硅羟基也会变得越来越多，从而更加容易造成拖尾峰。

另外，色谱柱在长时间使用特别是纯水经过反相柱之后固定相易流失，或折叠，也会导致柱效降低的情况。在冲洗色谱柱无法复原后，建议直接更换色谱柱。为延长柱寿命也可增加保护柱。